图书介绍
肿瘤分子生物学与细胞生物学实验手册2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载
- 陶永光主编 著
- 出版社： 长沙：湖南科学技术出版社
- ISBN：9787535783400
- 出版时间：2014
- 标注页数：178页
- 文件大小：29MB
- 文件页数：186页
- 主题词：肿瘤学－分子生物学－实验－手册；肿瘤学－细胞生物学－实验－手册
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图书目录
第一章 分子生物学基础研究1
第一节 DNA操作1
一、感受态细胞的制备1
二、细菌转化4
三、质粒DNA的抽提5
四、双限制性内切酶酶解反应6
第二节 RNA操作9
一、采用TRIzol法抽提总RNA9
二、反转录PCR12
三、实时荧光定量PCR15
第三节 蛋白质操作17
一、细胞内总蛋白抽提17
二、胞质和胞核蛋白抽提18
三、线粒体抽提20
四、BCA法蛋白浓度测定22
五、蛋白质免疫印迹法23
六、泛素化修饰30
七、激酶活性检测34
第二章 基因表达调控研究技术36
第一节 基因表达研究技术36
双荧光素酶报告基因系统36
第二节 基因敲除研究技术39
RNA干扰技术39
第三节 蛋白质与DNA相互作用研究技术43
一、EMSA凝胶迁移滞后实验43
二、染色质免疫沉淀技术49
第四节 蛋白质与蛋白质相互作用研究技术53
一、免疫共沉淀53
二、GST pull-down实验56
三、激光共聚焦荧光显微镜检测58
第三章 表观遗传学研究技术61
第一节 表观遗传61
一、生物信息学分析基因启动子区CpG island的分布情况61
二、甲基化特异性的聚合酶链式反应64
三、定量甲基化特异性PCR68
四、重亚硫酸盐测序法68
五、甲基化／5羟甲基化DNA免疫沉淀72
六、五羟甲基化DNA斑点杂交76
第二节 microRNAs78
一、miRNA的抽提和富集79
二、miRNA的检测方法82
三、miRNA靶基因的预测86
四、miRNA靶基因验证89
五、miRNA功能验证方法92
第四章 细胞培养和稳定细胞系的建立及相关操作95
第一节 细胞保种95
第二节 基因转染97
脂质体介导的基因转染技术97
第三节 慢病毒感染稳定细胞系的建立99
一、慢病毒包装99
二、慢病毒感染102
第四节 电离辐射的细胞效应104
一、放射抵抗细胞系的建立104
二、细胞存活曲线106
三、辐射诱导的DNA损伤及修复108
第五节 可视化细胞系模型的建立110
一、实验原理110
二、材料110
三、方法113
四、注意事项114
第五章 细胞生物学功能相关研究115
第一节 细胞增殖检测115
一、MTS法115
二、集落形成实验117
第二节 细胞周期120
流式细胞术检测细胞周期120
第三节 细胞侵袭与转移121
一、划痕实验121
二、细胞体外黏附实验122
三、迁移实验123
四、Transwell侵袭实验125
五、体外血管形成126
六、伪足实验127
第四节 细胞凋亡128
一、Annexin V/PI细胞凋亡检测128
二、Caspase活性检测129
三、DNA片段检测131
四、线粒体膜电位改变检测133
第五节 细胞自噬与程序性坏死研究方法134
一、细胞自噬的检测方法134
二、细胞程序性坏死检测140
第六节 细胞能量代谢142
一、葡萄糖和乳酸的体外检测142
二、细胞内氧化还原物质的检测144
三、ATPLite Assay检测细胞内ATP含量146
四、MitoTracker标记线粒体148
五、海马XF细胞代谢动态分析系统检测技术149
六、代谢组学156
第六章 动物实验162
第一节 移植瘤小鼠模型162
成瘤实验162
第二节 可视化的动物模型165
一、肿瘤原位可视化动物模型166
二、移植瘤可视化动物模型168
第三节 药物急性半数致死量（LD50）的测定168
第四节 免疫组化172
附录 常见英文名词与缩写175
后记178