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第一章 电喷雾质谱历史、理论和仪器原理1

第一节 简介：喷雾技术革命1

一、ESI出现之前的质谱技术1

二、电喷雾电离技术的发展4

第二节 操作原理11

一、ESI/APCI离子源的组成11

二、电喷雾电离：“去除溶剂，而非解吸附过程”12

三、电喷雾的过程：“纯”ESI条件下电喷雾电离针上发生的事件13

四、在小液滴干燥过程中发生的事件16

五、真空接口19

六、各种各样的辅助技术20

七、溶剂和缓冲液26

八、ESI-MS中观察到的各种离子29

九、非共价复合物30

十、从ESI质谱图看质谱离子与液相离子的关系32

十一、与大气压化学电离的比较33

第三节 质量分析器35

一、连续检测离子的质谱仪35

二、脉冲式质谱仪38

三、复合式串联质谱47

第四节 质谱的其他参数48

一、质量校正48

二、分辨率51

一、联立方程求算法52

三、质量准确度52

第五节 ESI-MS的数据处理52

二、分辨同位素峰53

三、数据转换（去卷积拆分）方法55

第六节 结论60

参考文献60

附录几种常用ESI校正校样的质荷比91

第二章 纳升喷雾电离的发展：LC/MS及CE/MS应用100

第一节 简介100

第二节 纳升流量的电极103

一、流量与电喷雾针的构造103

二、纳升流量样品导入系统的一些实例110

第三节 纳升流量液相色谱-质谱联用122

一、分析液相色谱色谱柱的小型化123

二、色谱柱和纳升电极的整体式装置124

三、多路NanoLC系统实例125

四、今后的方向130

第四节 结论132

参考文献134

第三章 电喷雾电离质谱定性分析药物及天然产物142

第一节 导言142

第二节 小分子化合物的结构特征144

一、分子量的确定144

二、多电荷电离146

三、盐148

四、液相色谱-质谱联用149

五、化学衍生和大气压化学电离源154

六、串联质谱155

第三节 抗生素及天然产物的结构解析157

一、抗生素157

二、利用［M＋H］+和［M＋Na］+离子解析结构162

三、相似化合物的质谱图167

四、负离子169

五、准确质量测定171

参考文献178

第四节 结论178

第四章 电喷雾质谱在组合化学中的应用182

第一节 导言182

第二节 化合物的鉴定184

第三节 纯化过程186

第四节 质量控制189

第五节 筛选191

一、生物亲和性筛选191

二、用QTOF质谱的准确质量测定194

三、FT-ICR质谱的准确质量测定196

第六节 分析前景198

参考文献200

第七节 结论200

第五章 电喷雾质谱在现代药物代谢和药物动力学中的应用206

第一节 导言206

第二节 药物代谢及药物动力学中的质谱平台207

一、四极杆质谱仪器的作用207

二、四极杆离子阱质谱仪的作用208

三、飞行时间质谱的作用210

四、四极杆／TOF复合型仪器的作用213

第三节 电喷雾质谱应用的发展213

一、定量分析213

二、确定药物的生物转化215

第四节 电喷雾质谱在新药开发研究中的应用218

一、新药开发研究中的定量分析219

二、新药开发中的生物转化220

第五节 自动化高通量分析224

一、样品制备225

二、选择MS条件226

三、样品分析226

四、数据处理与校阅231

五、尝试平行定量233

参考文献236

第六章 电喷雾质谱分析多肽与蛋白质方法学研究及其应用244

第一节 导言244

第二节 电喷雾质谱分析完整的蛋白质：方法学研究246

二、样品污染247

一、蛋白质混合物的电喷雾质谱247

第三节 电喷雾质谱的应用250

一、蛋白质组学250

二、二硫键的确定251

三、非共价键结合的蛋白质复合物253

第四节 分离和序列测定256

一、毛细管LC-MS256

二、毛细管LC-MS在蛋白质组学上的应用258

三、多肽的毛细管电泳质谱259

第五节 高质量多肽和蛋白质的串联质谱分析266

第六节 结论270

参考文献271

第七章 电喷雾质谱分析糖蛋白的结构275

第一节 简介275

第二节 确定糖蛋白的分子量276

一、分子量和多元性276

二、纳升电喷雾和正交加速TOF质谱280

第三节 糖蛋白指纹分析285

一、多糖的类型285

二、蛋白序列指纹分析和糖基化位点的确认286

三、确定连接位点的非均一性292

第四节 未来的发展方向294

参考文献295

第一节 简介299

第八章 先进的质谱方法快速研究和定量分析蛋白质组299

第二节 蛋白质组的目前测定方法301

第三节 使用质谱确定蛋白质303

第四节 利用FTICR质谱的特性测定蛋白质组304

第五节 完整蛋白质的蛋白质组分析方法307

一、毛细管等电聚焦法分离蛋白质308

二、CIEF与FTICR质谱联用309

三、自动处理数据和结果显示310

第六节 FTICR方法确定完整的蛋白质313

一、依据分子量确定完整的蛋白质313

二、依据MS/MS数据确认完整的蛋白质314

三、依据同位素标记确认完整的蛋白质317

一、准确质量标签用于蛋白质的确认319

第七节 测定全体蛋白质的蛋白质组分析方法319

二、提供准确质量标签确定翻译后修饰323

三、同位素编码亲和标签的准确质量标签325

第八节 根据实验产生的准确质量标签327

一、通过MS/MS来确认AMT327

二、多元MS/MS方法328

第九节 高通量测定蛋白质的相对强度331

一、稳定同位素的代谢标记332

二、后提取的稳定同位素标记法341

第十节 将来的方向344

参考文献345

第一节 简介352

第九章 非共价复合物的电喷雾电离质谱分析352

第二节 蛋白-配体相互作用354

一、pH值的影响355

二、溶剂的影响358

三、ESI锥孔电压的影响359

第三节 药物-蛋白质-配体复合物360

一、ras-GDP-配体360

二、确定键合的位置362

第四节 蛋白-金属络合物364

一、钙调节 蛋白／Ca364

二、HCV/Zn366

二、γ-IFN367

第五节 蛋白-蛋白结合367

一、亮氨酸拉链肽367

三、大蛋白复合物369

第六节 蛋白-核酸相互作用372

第七节 药物-核酸复合物373

一、与HIV-RNA键合的抗生素373

二、药物-DNA的相互作用374

第八节 结论375

参考文献375

第十章 氢交换法和电喷雾质谱研究蛋白质的结构及动态构象379

第一节 简介379

一、蛋白质的氢交换背景380

第二节 实验方法和实验设计380

二、MS测量H/D交换的实验方法382

三、质谱分析蛋白质的片段383

四、确定氘代的速率常数384

第三节 应用386

一、蛋白-配体和蛋白-金属离子相互作用386

二、蛋白质的折叠及动态构象389

三、筛选可用作重组药物的蛋白质394

四、从组合化合物库中筛选蛋白质394

五、单个酰胺分析方案395

第四节 结论和展望397

参考文献398

第十一章 利用微升电喷雾分析微量透析得到的神经肽及药物401

第一节 简介401

第二节 仪器403

一、毛细管喷雾针头403

二、获得高灵敏度的测定方法404

三、样品的在线预纯化405

四、使用微升ESI和串联质谱分析体内微量渗析物407

第三节 测量在细胞外释放的内源性神经降压素407

第四节 神经降压素代谢物的研究411

第五节 药物的微升电喷雾和体内微量渗析415

第六节 结论417

参考文献417