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1 神经生物学实验方法学1

1.1 科学思维方法学1

1.1.1 科学技术的历史动力1

1.1.2 辩证地去求索3

1.1.3 辩证地去思考6

1.1.4 辩证地去验证16

1.1.5 辩证地去训练22

1.2 实验设计方法学27

1.2.1 选题27

1.2.2 专业设计41

1.2.3 对照设计50

1.2.4 统计设计58

1.3 实验分析方法学73

1.3.1 数据整理73

1.3.2 统计分析82

1.3.3 专业分析92

1.3.4 论文书写100

1.4 电刺激方法学107

1.4.1 电刺激的基本原理108

1.4.2 电刺激的物理特性109

1.4.3 神经制备的生物特性113

1.4.4 选择性刺激116

1.4.5 刺激电流扩散120

1.5 电记录方法学124

1.5.1 容积导体内记录124

1.5.2 诱发电位记录131

1.5.3 单单位记录137

1.5.4 计算机辅助的记录144

1.5.5 细胞内记录148

1.5.6 膜片钳记录159

1.5.7 神经纤维速度谱测定163

1.5.8 轴突分叉点位置测定167

1.5.9 压脚痛阈测定法171

1.6 神经化学方法学174

1.6.1 组织细胞破碎法174

1.6.2 突触体制备177

1.6.3 电泳法181

1.6.4 色谱法187

1.6.5 高效液相色谱法196

1.6.6 微透析技术204

1.7 化学神经解剖学方法学210

1.7.1 免疫细胞化学技术211

1.7.2 原位杂交组织化学技术219

1.7.3 受体定位技术227

1.7.4 免疫电子显微镜技术228

1.8 神经形态学方法学231

1.8.1 辣根过氧化物酶示踪技术232

1.8.2 荧光素示踪技术238

1.8.3 放射性核素示踪技术239

1.8.4 顺行示踪技术246

1.8.5 激光扫描共聚焦显微镜技术248

1.8.6 定量及分析细胞学技术253

1.9 分子神经生物学方法学257

1.9.1 核酸分子杂交技术258

1.9.2 蛋白质免疫印迹分析技术265

1.9.3 DNA重组技术271

1.9.4 聚合酶链式反应技术279

1.9.5 DNA序列测定技术286

1.9.6 mRNA差异显示技术294

1.9.7 基因芯片技术299

1.9.8 转基因动物技术304

1.10.1 计算机辅助体层摄影308

1.10 脑成像308

1.10.2 磁共振成像311

1.10.3 放射性核素断层成像317

1.10.4 超声成像320

2 神经生物学实验与示教322

2.1 神经行为学实验322

2.1.1 一足致炎大鼠双足痛感受性的变化322

2.1.2 甲醛溶液致炎大鼠疼痛行为的观察324

2.1.3 神经反射在一足致炎大鼠非致炎足痛阈变化中的作用325

2.1.4 体液因素在一足致炎大鼠非致炎足痛阈变化中的作用327

2.1.5 急性缺氧预适应对小鼠缺氧耐受性的影响329

2.1.6 麻醉与兴奋小鼠缺氧耐受性的变化331

2.1.7 大鼠脊髓横断及半横断模型的复制333

2.2 神经生理学实验334

2.2.1 家兔外周神经干复合动作电位记录334

2.2.2 家兔后肢传入神经纤维速度谱336

2.2.3 扩张肛门对猫骶神经后根放电的影响338

2.2.4 大鼠脊髓节段性及下行性诱发电位记录340

2.2.5 脊髓节段性缺血时脊髓诱发电位的变化341

2.2.6 家兔大脑皮质体感诱发电位记录343

2.2.7 脑缺血对家兔大脑皮质诱发电位的变化345

2.2.8 蟾蜍离体脊神经节神经元静息膜电位与动作电位记录347

2.2.9 大鼠培养脑细胞膜的电学特性349

2.2.10 大鼠在体脊神经节神经元动作电位的细胞内记录351

2.2.11 猫脊髓背索突触后神经元的细胞内与细胞外记录354

2.2.12 猫脊颈束-背索突触后神经元的顺、逆向反应355

2.2.13 大鼠脊髓背角神经元电活动的细胞内记录357

2.2.14 大鼠脊孤束-背索突触后神经元对躯体与内脏传入的反应359

2.2.15 家兔中缝大核对外周传入刺激的反应361

2.2.16 家兔丘脑腹后外侧核电活动的细胞外记录362

2.2.17 躯体内脏传入在脊髓背角的相互作用364

2.2.18 缺氧预适应鼠脑提取液对ATP敏感性钾电流的作用365

2.3.1 缺氧耐受小鼠脑匀浆提取液的抗缺氧作用372

2.3 神经化学实验372

2.3.2 急性重复缺氧小鼠脑单胺类含量的变化374

2.3.3 不同强度躯体刺激对家兔脑脊液中Ca2+、Mg2+含量的影响377

2.3.4 不同强度躯体刺激对家兔脑脊液中单胺类含量的影响380

2.3.5 兔脑内腺苷的微透析法测定383

2.3.6 缺氧对小鼠大脑皮层突触体LDH透出率的影响384

2.3.7 低氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞的保护效应386

2.4 神经组织免疫细胞化学实验388

2.4.1 延髓背角和中缝大核内的P物质样阳性结构388

2.4.2 大鼠三叉神经节内阿片μ受体与降钙素基因相关肽共存的阳性神经元391

2.4.3 大鼠延髓背角浅层内P物质样阳性终末与含钙结合蛋白神经元的联系393

2.4.4 面口部注射甲醛溶液后大鼠延髓背角内的FOS样阳性神经元观察395

2.4.5 大鼠中缝核簇内5-羟色胺样阳性神经元表达FOS蛋白397

2.4.6 大鼠延髓背角内向丘脑投射的FOS样阳性神经元399

2.4.7 大鼠三叉神经节内钙结合素mRNA阳性神经元的分布402

2.4.8 大鼠中脑导水管周围灰质内的5-羟色胺样阳性亚微结构405

2.4.9 大鼠孤束核内GABA能纤维终末与P物质受体样阳性神经元的突触联系408

2.4.10 大鼠延髓背角内GABA能神经元与P物质能纤维终末的突触联系410

2.5 神经形态学实验413

2.5.1 大鼠脊髓灰质向孤束核的投射413

2.5.2 猫脊髓背角神经元向外侧预核和背索核的分支投射415

2.5.3 大鼠脊孤束-背索突触后神经元的超(亚)微结构416

2.5.4 大鼠脊孤束-背索突触后神经元对躯体感觉核与内脏感觉核的分支投射418

2.5.5 大鼠脊髓立体定位磁控过半夹断模型420

2.5.6 大鼠臂旁核向杏仁中央核的投射421

2.5.7 大鼠中脑导水管周围灰质向伏核的5-羟色胺能投射424

2.5.8 大鼠延髓背角内P物质受体样阳性神经元向丘脑胶状质核投射427

2.5.9 大鼠中缝大核向脊髓背角和延髓背角的分支投射429

2.5.10 中脑导水管周围灰质和中缝背核内5-羟色胺能神经元的下行分支投射431

2.5.11 大鼠三叉神经脊束核吻侧亚核向三叉神经运动核的投射434

2.5.12 大鼠延髓背角浅层向臂旁核及丘脑腹后内侧核的投射437

2.5.13 大鼠中脑导水管周围灰质-中缝大核-三叉神经感觉核簇的间接投射439

2.5.14 大鼠中脑导水管周围灰质-中缝大核-三叉神经脊束核尾侧亚核的间接投射442

2.5.15 大鼠延髓背角向丘脑投射神经元与5-羟色胺阳性终末的突触联系444

2.5.16 在鼠孤束核-臂旁核-中央杏仁核的间接投射通路447

2.6 分子神经生物学实验450

2.6.1 用差异显示法分离特异表达的基因片段450

2.6.2 慢性缺氧培养细胞中缺氧诱导因子-1的提取与检测454

2.6.3 大鼠三叉神经节总RNA的提取及cDNA的制备457

2.6.4 5-HT3受体亚型mRNA在大鼠三叉神经节的表达459

2.6.5 乙酰胆碱转移酶在大鼠纹状体的表达及其DNA片段的回收462

2.6.6 乙酰胆碱转移酶DNA片段的亚克隆464

2.6.7 ChAT-pGEM重组质粒DNA的制备及限制酶切分析466

2.6.8 ChAT-pGEM重组质粒DNA序列的测定469

2.6.9 乙酰胆碱转移酶表达蛋白的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析472

2.6.10 乙酰胆碱转移酶在大鼠纹状体分布的Western blot检测475

2.6.11 性激素对周围伤害性刺激诱导脊髓PPD mRNA表达上调的影响478

2.6.12 坐骨神经部分切断后初级感觉神经元(背根节)的差异表达基因克隆481

3 神经生物学资料486

3.1 神经生物学常见概念486

3.1.1 生物电学常见概念486

3.1.2 生物化学常见词汇492

3.1.3 细胞培养常见词汇495

3.1.4 分子生物学常见词汇498

3.2 常用的实验方法502

3.2.1 电生理学仪器方法502

3.2.2 动物实验的实施509

3.3 实验动物常用数据519

3.3.1 实验动物常用生理数据519

3.3.2 实验动物常用麻醉剂与肌肉松弛剂520

3.4 常用试剂、缓冲液、储存液与酶的配制523

3.4.1 组织培养常用试剂523

3.4.2 电泳缓冲剂524

3.4.3 常用贮存液525

3.4.4 常用酶的配制527

3.5 常用限制酶识别序列528

3.6 常用细胞系、细胞培养基、抗生素533

3.6.1 细胞系533

3.6.2 常用培养液成分及配方535

3.6.3 抗生素537

3.7 核酸、蛋白质常用数据及分子量标准参照物537

3.7.1 常用核酸的长度与分子量537

3.7.2 常用蛋白质分子量标准参照物537

3.8 赫尔辛基宣言Ⅱ538